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SuperCultureTM 小鼠淋巴细胞培养基

公布工夫:2016.11.07

                                                         

     

 SuperCultureTM  小鼠淋巴细胞培养基(Serum-Free Medium for Lymphocyte)适用于小鼠淋巴细胞、DC 细胞的体外造就。本产物是一款化学成分限制的培养基,该培养基中的所有身分均运用细胞培养级别的质料消费,不露血清,有用制止血清质量更改及血清组分、中源身分对实行研讨的影响,可实现小鼠淋巴细胞、DC 细胞等免疫细胞的体外造就。


使用方法:

例1:小鼠T淋巴细胞培养

1、 造就器皿的预包被:与 5μg/ml 小鼠 CD3 单抗包被造就器皿,4℃留宿或 37℃孵育 2 小时。运用前移除盈余包被液。

2、 将 SuperCultureTM  小鼠淋巴细胞培养基安排室温均衡。

3、 无菌星散小鼠外周血淋巴细胞或脾脏淋巴细胞(发起运用达优小鼠淋巴细胞星散

液:DKW33-R0100)。

4、 凭据计数效果,用SuperCultureTM  小鼠淋巴细胞培养基将星散得到的淋巴细胞按2-2.5×106 个/ml 的浓度接种于已包被小鼠 CD3 单抗的细胞培养器皿中,到场 5μg/ml 的小鼠 CD28 单抗、300U/ml 的 rmIL-2,刺激 T 淋巴细胞的发展和增殖,37℃,5% CO2、饱和湿度的造就箱中造就。

5、 视察细胞活化状况,每 2-3  天取样计数细胞浓度并凭据计数效果增补新颖

SuperCultureTM  小鼠淋巴细胞培养基(露 300U/ml 的 rmIL-2),调解细胞浓度为 1.5×106个/ml。

6、 劳绩细胞供后续检测或实行运用。

 

2:小鼠骨髓DC细胞培养

1、 将 SuperCultureTM  小鼠淋巴细胞培养基安排室温均衡。

2、 无菌星散小鼠骨髓单核细胞。凭据计数效果,用 SuperCultureTM  小鼠淋巴细胞

培养基将星散得到的单核细胞按 1-5×106 个/ml 的浓度接种于 6 孔板或 12 孔板中,每孔到场末浓度 200U/ml 的 rmGM-CSF 和 rmIL-4,37℃,5% CO2、饱和湿度的造就箱造就。

3、 48 小时后,悄悄晃悠造就板,吸弃全部培养基及悬浮细胞,加露 200U/ml 的 rmGM-CSF 和 rmIL-4 的新颖培养基继承造就。

4、 隔日半量换液,即收集旧培养液,离心后用含 200U/ml 的 rmGM-CSF 和 rmIL-4

的新颖培养基重悬细胞沉淀,然后再将细胞悬液放回本皿。

5、 第 6 天半量换液后加细胞因子 TNF-α 1000U/ml 或其他促成熟的细胞因子,继

绝造就两天,以增进树突状细胞成熟(可在 TNF-α 到场前 1 天到场抗原,以得到抗原负载的 DC)。

6、 收集悬浮和细微揭壁的细胞,即为成熟的 DC。


生存要领:

2~8℃,避光生存,连结无菌,保质期 12 个月。

注重:

 

本品制止重复冻融,运用时注重无菌操纵。

本品造就T淋巴细胞时,到场2-5%的细胞培养添加物可加强细胞扩增效力。



货号

       称号

规格







SuperCultureTM 小鼠淋巴细胞培养基



DKW34-MCL1


250ml



Serum-Free Medium for Mouse Lymphocyte









本品仅供研讨运用。


400-630-4366
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