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Celigo齐视野细胞剖析仪

Celigo Image Cytometer齐视野细胞扫描剖析仪是一款新科技的细胞齐孔高速扫描成像剖析仪。

其分辨率充足下,到达1um成像精度,相当于显微镜15X放大倍数,关于处置惩罚单个细胞的旌旗灯号辨认是充足清楚完好的。

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Celigo的典范图象以下:

其次,在这类成像精度下,怎样实现对1536孔,384孔,96孔,24孔,以至6孔板的齐孔成像呢?那涉及到其接纳的一个奇特光学手艺,运用一个大型的F-theta透镜和电磁检流计镜片去对齐孔进止大面积快速扫描。其手艺原理图如左。在该手艺下,透镜的位移完整由电磁鞭策,平静快速而完整没有机器位移,其精度可小于1um,从而包管了后续的多图象拼接连结了一致性。

那便带来了细胞大规模图象剖析的几个优点:

☆ 原位in situ
在细胞发展的历程中无需消化细胞,无需取样,无需停止任何处置惩罚,可在任何工夫点随时成像,随时剖析,随时得到统计学数据处理效果。

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☆ 齐孔 full well
如6孔板一个孔的完好细胞图象,由256张细胞图象拼接而成;96孔板一个孔的完好细胞图象,由16张细胞图象拼接而成。因为每一个孔均是高清晰度的齐孔细胞剖析,从而包管了统计学意义的一致性。(孔取孔之间因为细胞加样量的差别,细胞发展的差别,悬浮沉降细胞挪动致使的流动小视野不克不及正确追踪等题目均获得处理。)

☆ 齐孔照明亮度的均一。那是因为扫描光路的特性带来的。图象睹下:

☆ 快速。那是体系的扫描光路电磁透镜手艺带来的。其处置惩罚齐孔高精度图象剖析下的处置惩罚速度以下:

Plate TypeImages / WellResolution(mm/pixel)Typical Time (min)
1536 well12<6 min
384 well12<2 min
384 well42<5 min
96 well162<3.5 min
96 well161<10 min

 

☆ 整板whole plate
整板的齐孔图象预览和曲线剖析带来一览无余的细胞剖析效果,而那统统均在<10min的速度下完成,从而简朴实现多时间点的整板细胞发展剖析快速追踪。
适用于各种规格细胞培养板(6/12/24/96/384/1536孔板)和造就瓶(T-25&T-75)。

☆ 多通道multi channels
共有四个通道,接纳四个自力的LED光源,包孕一个下质量的明场通道,和三个荧光通道。标配:
- 蓝色荧光:ex/em377/477(e.g., Hoechst, DAPI)
- 绿色荧光:ex/em483/536(e.g., FITC, Calcein, Alexa Fluor 488, GFP)
- 赤色荧光:ex/em531/629 (e.g., PI, Texas Red, Alexa Fluor 568)
选配:可交换以上三个荧光的任一通道
- Far-Red (e.g. Alexa Fluor 647, DRAQ5)


Celigo能做什么?
Celigo是一款基于多荧光通道细胞成像的快速齐孔&整板扫描剖析仪,因而基于细胞成像的关于齐孔的细胞发展监测和齐孔的细胞荧光功用检测的运用,皆能够选择Celigo。

☆ 基于下质量明场的细胞发展剖析 Label-free assays

天真的剖析软件设计能够经由过程两种剖析要领获得细胞增殖曲线。

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☆ 基于荧光通道的细胞功能分析Fluorescence assays

运用举例:

细胞活性(毒性)剖析 Cell Viability(Toxicity)
经由过程Calcein AM/PI/Hoechst33342三种荧光染料离别符号活/死/全部细胞。经由过程Celigo可轻松获得齐孔&整板细胞图象和主动讲演活死细胞百分比,和不同组其余对比数据。

细胞增殖(DNA分解)Cell Proliferation(DNA Synthesis)
细胞图象数据
A.96孔板全孔A549细胞图象(BrdU-绿色,DAPI-蓝色);B.部分放大全孔细胞图象(DAPI-所有细胞,BrdU-S期细胞)

设门数据

克隆构成Colony Formation

细胞迁徙(毁伤修复)Cell Migration(Wound Healing)
运用Oris Platypus公用毁伤修复板,经由过程Celigo主动剖析明场&荧光通道细胞数目或细胞融合度,得到毁伤修复/迁徙的细胞增殖状况。

荧光卵白表达Fluorescence Proteins
96孔板中扫描齐孔Hela细胞转染后GFP/RFP表达的状况。

瞬时转染差别浓度的编码turbo-GFP的质粒到Hela细胞,转染后多个工夫点剖析96孔板中GFP阳性表达率,GFP阳性细胞数,和死细胞(PI符号)的百分比。

3D肿瘤球剖析3D Tumor Speroid

17-AAG和PI-103浓度依赖性的肿瘤球发展抑止。

(a) 细胞接种、加药、Celigo成像和剖析流程图;(b-g) 差别药物浓度对肿瘤球发展的抑止状况。

细胞重编程iPSC Reprogramming

小鼠胚胎成纤维细胞经由过程Yamanaka要领引诱天生iPSC,经由过程Celigo扫描6孔板检测和剖析iPSC克隆构成状况。
Data courtesy of Kaji Lab, MRC Centre for Regenerative Medicine, University of Edinburgh

干细胞多能性审定Stem Cell Pluripotency

引诱后的多能干细胞经由过程Celigo检测特异性多能干细胞的符号(OCT4,SSEA4)。


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