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ECIS细胞静态剖析仪

ECIS是一种先辈的生物传感器手艺,可以或许丈量因为细胞揭壁状况、位置、形状等方面发作的转变。将细胞增加在特别电极板的微孔内(400ml),经由过程微电流传感器及时、定量、非参与性的

丈量细胞活性状况的改动。 如图为一个8孔金属电极丈量板,每孔中都可造就细胞。当细胞在电极上附着而且揭壁转变大概迁徙时,这些转变被传输到仪器的检测端,该转变反应了细胞的一些特性改动,如:形态学转变、揭壁才能、细胞迁徙活动、细胞掩盖水平、细胞取基底空间等。

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ECIS细胞静态剖析仪运用

一、 细胞毁伤修复运用

传统细胞毁伤修复

传统的细胞毁伤修复实行一样平常运用发展增殖快的单细胞层,然后在细胞层上整齐条线,小面积的细胞层被毁伤。当四周细胞进入而且发展填满被破坏的地区时(修复),能够用显微镜搜检到破坏的地区里的细胞状态。

2)ECIS手艺要领

ECIS方轨则能够完成自动化剖析实行。当赐与电极较强的霎时电流时,丈量电极上的细胞就会被击穿、毁伤,然后有局部细胞殒命。
典范的毁伤修复实行如下图所示。BSC1细胞起首长成单细胞层,然后两个孔中赐与点击,使丈量电极上的细胞殒命,引发阻抗值低落。随时间的延伸那两个曲线又回到初始数值,那是因为那些在电极中的一般细胞背毁伤区域迁徙并重重生少而且交换已死去细胞。


ECIS是完整自动化的剖析要领,全部实行历程在软件掌握下停止,实行数占有很好的重复性,而且有利于停止统计分析。

二、 细胞舒展揭壁

ECIS手艺的主要运用之一是研讨细胞舒展揭壁行动。这类测量方法能够研讨细胞取细胞中基质的相互作用对细胞揭壁才能的感化。这种方法是及时的和定量天,和传统的起点法相比有着明显的上风。


如图所示两种不同类型的细胞揭壁速度存在很大差别。起首将一样数量的BSC1和NRK细胞接种在电极孔中,直至两种细胞构成密集的细胞层,很明显BSC1细胞有着更快的揭壁和发展速度。

三、肿瘤细胞侵润研讨

内皮细胞层的竖立

ECIS圆孔电极起首包被明胶层,然后HUVEC细胞悬液到场到板孔中,在到场细胞后的2个小时构成单细胞层:

上图分别是到场G细胞、AT3细胞和对比的内皮细胞层阻抗曲线。能够看到跟着肿瘤细胞的到场,内皮细胞层阻抗值最先低落,而且AT3细胞引发的低落越发明显,阻抗值低落的缘由是由肿瘤细胞的侵入影响了完好的内皮细胞层。

四、体外毒理学检测

细胞的发展遭到培养基中化学成分的影响,因而能够应用ECIS手艺检测药物对细胞的毒理学影响:

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上图是十二烷基磺酸钠对WI-38细胞的感化,能够看出这类化合物对细胞的发展有着显着的抑止感化,而且浓度越下抑止结果越明显。

五、细胞的趋化迁徙

ECIS细胞静态剖析仪有着下灵敏度,以至能够检测单个细胞的微活动:

A:以叶酸为趋化化合物,少许NC4A2细胞从电极板一侧(左下)迁徙(右上)丈量到的细胞层电阻值转变。由图可见,跟着细胞进入电极孔局限,电阻值上升,跟着细胞进一步迁徙出电极孔,电阻值又下落

B:显微镜下视察迁徙历程,取电阻测定值对应

六、别的的运用

细胞层屏蔽功用的研讨

细胞旌旗灯号转导的研讨

活动状况下细胞行动的研讨

 

更具体的引见请见美国Applied Biophysics公司的主页:


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